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    Premium One Expression Kit (CFS-EDX-ONE)

    廠家:天根生化科技(北京)有限公司
      目錄號 規 格 價 格
    CFS-EDX-ONE 55 μl×24 rxn 5000元
    產品簡介

    本試劑盒能夠通過線性模板或質粒模板實現小規模蛋白表達。本試劑盒采用轉錄和翻譯偶聯的方法,試劑盒中提供麥胚無細胞蛋白表達系統預混mixmix中包含蛋白轉錄、翻譯的所有必需酶類、tRNA和離子環境,只需加入DNA模板即可一步完成蛋白的轉錄和翻譯,直接獲取目的蛋白。此外,試劑盒中還包括線性模板構建所需PCR引物,以及pEU-01-DHFR質粒作為陽性對照,另提供帶有熒光標記的賴氨酸-tRNA,用以標記合成蛋白,便于觀測。本試劑盒利用雙層液相反應法(Bilayer)表達目的蛋白,只需1-4小時即可觀察到目的蛋白,每個反應蛋白表達量為1-3 μg,除了可以應用于Western蛋白檢測實驗之外,還可作為模板測試試劑,快速檢測目的質粒或片段能否成功表達目的蛋白。能夠在本試劑盒表達成功的模板質粒或片段,可直接應用于CFS系列其他試劑盒中,做大量蛋白表達使用。


    產品特點

    選擇方便:可用質粒模板,也可直接使用PCR片段進行蛋白表達

    操作簡單:采用Bilayer 反應方法,不需要特殊儀器,只需加入模板即可進行反應

    表達快速:1-4小時即可觀察到目的蛋白表達

    檢測容易:可選擇使用熒光標記的Lys-tRNA,用過熒光直接檢測蛋白表達效果


    儲存條件

    低于-70保存,避免長期存放于干冰環境,反復凍融不超過2


    實驗例


    使用質粒作為表達模板時,可以使用pEU系列質粒作為表達載體,將帶有起始密碼子和終止密碼子的cDNA克隆至載體上,提取質粒后直接用于蛋白表達。亦可使用其他帶有SP6啟動子的表達載體進行蛋白表達,不要使用T7啟動子。



    使用PCR片段做表達模板時,應使用兩步PCR反應,將核糖體結合位點和轉錄啟動子作為上游引物的5’端,經PCR反應結合到片段上。片段純化后可用于蛋白表達。



    轉錄和翻譯采用雙層液相反應法(Bilayer Reaction Method),通過反應液和麥胚裂解物造成的密度差,相互滲透,在液面相交處發生反應。隨著時間的推進,溶液逐漸由兩相變為單一的混合物而終止。



    使用Premium One表達對照質粒中DHFR蛋白結果展示。1. 使用考馬斯亮藍(CBB)染色,蛋白表達后4-12小時可見目的蛋白條帶。2. 使用Western Blot標記,表達后1-2小時可標記出目的條帶。3. 使用Lys-tRNA參與蛋白表達,2-4小時候可通過熒光檢測目的蛋白的表達情況。

    地址:北京市海淀區西小口路66號東升科技園(北領地)C7-3 電話:800-990-6057
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